Viral RNA Isolation Kit para sa Viral RNA Purification mula sa Plasma, Serum, at Iba Pang Mga Sample
Paglalarawan ng Kit:
Cat.No.RE-02011/02014
Para sa paglilinis ng viral RNA mula sa plasma, serum, mga likido sa katawan na walang cell, mga supernatant ng cell-culture.
Mabilis na ihiwalay at linisin ang viral RNA mula sa mga sample gaya ng plasma, serum, mga cell-free body fluid at mga cell culture supernatant.
-Hindi na kailangang mag-alala tungkol sa pagkasira ng RNA.Ang buong kit ay RNase-Free
-Simple—lahat ng operasyon ay nakumpleto sa room temperature
-Mabilis—maaaring makumpleto ang operasyon sa loob ng 20 minuto
-Mataas na RNA yield: RNA-only Column at natatanging formula ay maaaring mahusay na maglinis ng RNA
-Ligtas—walang ginagamit na organikong reagent
-Malaking kapasidad sa pagpoproseso ng sample—hanggang sa 200μl na mga sample ang maaaring iproseso sa bawat oras.
-Mataas na kalidad—ang purified RNA ay lubos na dalisay, walang protina at iba pang mga dumi, at maaaring matugunan ang iba't ibang mga pang-eksperimentong aplikasyon sa ibaba ng agos.
Mga paglalarawan
Ginagamit ng kit ang spin column at formula na binuo ng Foregene, na mahusay na nakakakuha ng high-purity at mataas na kalidad na viral RNA mula sa mga sample gaya ng plasma, serum, cell-free body fluid, at cell culture supernatant.Ang kit ay partikular na nagdaragdag ng Linear Acrylamide, na madaling makuha ang maliit na halaga ng RNA mula sa mga sample.Ang RNA-Only Column ay maaaring mahusay na magbigkis ng RNA.Ang kit ay maaaring magproseso ng isang malaking bilang ng mga sample sa parehong oras.
Ang buong kit ay hindi naglalaman ng RNase, kaya ang purified RNA ay hindi mapapasama.Maaaring tiyakin ng Buffer viRW1 at Buffer viRW2 na ang nakuhang viral nucleic acid ay walang protina, nuclease o iba pang mga dumi, na maaaring direktang gamitin para sa mga eksperimento sa downstream na molecular biology.
Mga pagtutukoy
50 Preps, 200 Preps
Mga bahagi ng kit
| Linear Acrylamide |
| Buffer viRL |
| Buffer viRW1, Buffer viRW2 |
| RNase-Free ddH2O |
| RNA-Only Column |
| Mga tagubilin |
Mga tampok at kalamangan
-Hindi na kailangang mag-alala tungkol sa pagkasira ng RNA.Ang buong kit ay RNase-Free
-Simple—lahat ng operasyon ay nakumpleto sa room temperature
-Mabilis—maaaring makumpleto ang operasyon sa loob ng 20 minuto
-Mataas na RNA yield: RNA-only Column at natatanging formula ay maaaring mahusay na maglinis ng RNA
-Ligtas—walang ginagamit na organikong reagent
-Malaking kapasidad sa pagpoproseso ng sample—hanggang sa 200μl na mga sample ang maaaring iproseso sa bawat oras.
-Mataas na kalidad—ang purified RNA ay lubos na dalisay, walang protina at iba pang mga dumi, at maaaring matugunan ang iba't ibang mga pang-eksperimentong aplikasyon sa ibaba ng agos.
Mga parameter ng kit
Application ng kit:
Ito ay angkop para sa pagkuha at paglilinis ng viral RNA sa mga sample tulad ng plasma, serum, cell-free body fluid at cell culture supernatant.
Daloy ng trabaho
Mga kondisyon ng imbakan
- Ang kit ay maaaring itago ng 24 na buwan sa temperatura ng silid (15-25 ℃), o 2-8 ℃ para sa mas mahabang panahon.
-Linear Acrylamide solusyon ay maaaring naka-imbak sa room temperatura para sa 7 araw.Pagkatapos matanggap ang kit, mangyaring kunin ang Linear Acrylamide solution at itabi ito sa -20 ℃.
-Pagkatapos magdagdag ng Linear Acrylamide sa Buffer viRL, maaari itong maimbak sa 2-8 ℃ hanggang 48h.Mangyaring gamitin ang sariwang inihandang solusyon.
Mga gabay para sa pagsusuri ng mga problema
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Walang RNA ang maaaring makuha o mababa ang ani ng nucleic acid
Karaniwang maraming salik ang nakakaapekto sa kahusayan sa pagbawi, gaya ng: sample na nilalaman ng RNA, paraan ng pagpapatakbo, dami ng elution, atbp.
Pagsusuri ng mga karaniwang sanhi:
1. Ice bath o low-temperature (4 ° C) centrifugation sa panahon ng operasyon.
Mungkahi: Operasyon sa temperatura ng silid (15-25 ° C), hindi kailanman ice bath at low temperature centrifuge.
2. Hindi wastong pag-iimbak ng sample o pag-iimbak ng sample nang masyadong mahaba.
Mungkahi: Mag-imbak ng mga sample sa -80 ° C o mag-freeze sa likidong nitrogen, at iwasan ang paulit-ulit na paggamit ng freeze-thaw;subukang gumamit ng mga bagong nakolektang sample para sa RNA extraction.
3.Hindi sapat na sample lysis
Rekomendasyon: Pakitiyak na ang sample at ang gumaganang solusyon (Linear Acrylamide) ay lubusang pinaghalo at na-incubate sa loob ng 10 min sa temperatura ng silid (15-25 ° C)
4.Maling naidagdag ang eluent
Rekomendasyon: Tiyaking idinaragdag ang RNase-Free ddH2O sa gitna ng lamad ng column ng purification
5. Hindi wastong dami ng anhydrous ethanol sa Buffer viRW2
Mungkahi: Mangyaring sundin ang mga tagubilin, idagdag ang tamang dami ng anhydrous ethanol sa Buffer viRW2 at ihalo nang mabuti ang mga ito bago gamitin ang kit.
6. Hindi wastong paggamit ng sample.
Mungkahi: 200µl ng sample bawat 500μl ng Buffer viRL.Ang sobrang dami ng sample ay magreresulta sa pagbawas ng rate ng pagkuha ng RNA.
7. Hindi wastong dami ng elution o hindi kumpletong elution.
Mungkahi: Ang eluent volume ng purification column ay 30-50μl;kung hindi kasiya-siya ang elution effect, inirerekomendang magdagdag ng pre-heated RNase-Free ddH2O at pahabain ang oras ng paglalagay sa temperatura ng silid, tulad ng 5-10min
8. Ang column ng purification ay may nalalabi na ethanol pagkatapos banlawan sa Buffer viRW2.
Mungkahi: Kung nananatili pa rin ang ethanol pagkatapos banlawan sa Buffer viRW2 at empty-tube centrifugation sa loob ng 2min, ang purification column ay maaaring iwan sa room temperature ng 5min pagkatapos ng empty-tube centrifugation upang ganap na maalis ang natitirang ethanol.
Ang pagkasira ng purified RNA molecules
Ang kalidad ng purified RNA ay nauugnay sa mga salik tulad ng sample storage, RNase contamination, at operasyon.
Pagsusuri ng mga karaniwang sanhi:
1. Ang mga nakolektang sample ay hindi na-save sa oras.
Mungkahi: Kung ang sample ay hindi ginamit sa oras pagkatapos ng koleksyon, mangyaring itabi ito kaagad sa -80 ℃ o liquid nitrogen.Para sa pagkuha ng mga molekula ng RNA, subukang gumamit ng mga bagong nakolektang sample hangga't maaari.
2. Ang mga nakolektang sample ay nagyeyelo at natunaw nang paulit-ulit.
Mungkahi: Iwasan ang paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw (hindi hihigit sa isang beses) sa panahon ng pagkolekta at pag-iimbak ng sample, kung hindi ay bababa ang ani ng nucleic acid.
3. Ang RNase ay ipinakilala sa operating room o walang mga disposable gloves, mask, atbp. ang isinuot.
Mungkahi: Ang pagkuha ng RNA molecules eksperimento ay pinakamahusay na ginanap sa isang hiwalay na RNA operation room, at ang experimental table ay nililinis bago ang eksperimento.Magsuot ng mga disposable gloves at mask sa panahon ng eksperimento upang maiwasan ang pagkasira ng RNA na dulot ng pagpapakilala ng RNase.
4. Ang reagent ay kontaminado ng RNase habang ginagamit.
Mungkahi: Palitan ng bagong Viral RNA Isolation Kit para sa mga kaugnay na eksperimento.
5. Ang kontaminasyon ng RNase ng mga centrifuge tube, pipette tip, atbp. Mungkahi: Siguraduhin na ang centrifuge tubes, pipette tip, at pipette ay lahat ay RNase-Free.
Naapektuhan ng mga purified RNA molecule ang mga eksperimento sa ibaba ng agos
Ang mga molekula ng RNA na pinadalisay ng column ng purification ay makakaapekto sa mga eksperimento sa ibaba ng agos kung mayroong masyadong maraming salt ions o protina, tulad ng: reverse transcription, Northern Blot, atbp.
1. May mga natitirang salt ions sa mga eluted RNA molecules.
Rekomendasyon: Siguraduhin na ang tamang dami ng anhydrous ethanol ay naidagdag sa Buffer viRW2, at hugasan ang purification column nang dalawang beses ayon sa tamang centrifugation speed sa mga tagubilin sa pagpapatakbo; Kung may natitira pang mga salt ions, maaari mong idagdag ang Buffer viRW2 sa purification column, at iwanan ito sa temperatura ng kuwarto sa loob ng 5min.Pagkatapos ay magsagawa ng centrifugation upang alisin ang kontaminasyon ng mga ion ng asin sa pinakamaraming lawak
2. May mga natitirang ethanol sa eluted RNA molecules
Mungkahi: sa sandaling makumpirma na ang mga column ng purification ay nahugasan na ng Buffer viRW2, magsagawa ng empty-tube centrifugation ayon sa centrifugal speed sa mga tagubilin sa pagpapatakbo.Kung may natitira pang ethanol, maaari itong iwanan ng 5 minuto sa temperatura ng silid pagkatapos ng sentrifugasyon na walang laman ang tubo upang maalis ang natitirang ethanol sa pinakamalawak na lawak.
Mga Manwal ng Pagtuturo:
Viral RNA Isolation Kit Instruction Manual
