• facebook
  • linkedin
  • youtube

Ang pagsilang ng PCR

PCR(Polymerase Chain Reaction)

Mahigit 30 taon na ang nakalipas mula nang maimbento ang polymerase chain reaction.Sa loob ng higit sa 30 taon, pagkatapos ng maraming iskolar sa buong mundo na patuloy na dagdagan at pahusayin, ang teknolohiya ng PCR ay naging pinakamalawak at pinakamadalas na ginagamit at pinakamahalagang pangunahing paraan ng pananaliksik sa buong larangan ng Life Sciences.

Ang TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR, atbp. na binuo batay sa malawak na aplikasyon ng tradisyunal na teknolohiya ng PCR, gayundin ang bagong lumabas na Digital PCR (digital PCR), ay lubos na nagpayaman sa mga pamamaraan ng pananaliksik ng karamihan ng mga siyentipikong mananaliksik at lubos na pinabilis ang proseso ng pag-unlad ng modernong Life Sciences, lalo na ang molekular na biology, ay gumawa ng malaking kontribusyon sa buhay at kalikasan ng tao.

Prinsipyo ng PCR
Polymerase-Chain-Reaction-PCR

Mga depekto ng tradisyonal na teknolohiya ng PCR

Complex nucleic acid separation atpagkuha:

★ Tradisyunal na teknolohiya ng PCR: kinakailangan

★ teknolohiyang hinango ng PCR: kinakailangan

★ Mga sample ng DNA at RNA: malaking pagkakaiba, mahirap na mga kinakailangan sa operasyon

★ Mga panganib sa katawan: nakakapinsala sa katawan ang mga nakakalason na reagents

640

Ang tradisyunal na teknolohiya ng PCR at derivative na teknolohiya ay mayroong kinakailangang-nucleic acid separation at purification

Ang anumang biological sample ay kailangang dumaan sa isang serye ng kumplikado at nakakapagod na pagpoproseso ng sample upang makakuha ng mga sample ng nucleic acid na nakakatugon sa mga kinakailangan ng teknolohiya ng PCR.

Ang paghihiwalay at pagkuha ng DNA at RNA ay palaging isang pangunahing gawain na kailangang ulitin ng mga nauugnay na siyentipikong mananaliksik araw-araw.

Dahil sa malaking pagkakaiba sa pagitan ng mga sample, ang mga proseso ng paghihiwalay at pagkuha ng DNA at RNA ay ibang-iba din.Ang gawaing ito ay nangangailangan ng mataas na antas ng teknikal na kasanayan para sa mga operator.Ang mga tradisyunal na pamamaraan ng paghihiwalay at pagkuha ay nangangailangan ng pangmatagalang pakikipag-ugnay sa ilang mga nakakalason na kemikal na reagents.Magdudulot ito ng hindi maibabalik na pinsala sa katawan ng operator, at maging sanhi ng direktang pinsala sa panahon ng eksperimento.

p5

Kasabay nito, para sa mga may malaking bilang ng mga sample na pag-aaralan, ang paghihiwalay at pagkuha ng mga nucleic acid ay isang labor-intensive na gawain.

Ang mga nucleic acid isolation at extraction kit sa merkado ay nasa hustong gulang na at maraming brand, ngunit halos pareho sila.Kung ito man ay isang silica gel membrane column centrifugal kit o isang magnetic bead method kit, ito ay tumatagal ng maraming oras at magastos.Bilang karagdagan sa halaga ng kit, mayroon ding mga espesyal na kinakailangan para sa mga kagamitan sa laboratoryo.Ang automated workstation na ginamit sa magnetic bead method ay isang napaka-typical na malakihang kagamitan na may mataas na halaga, na isang malaking gastos para sa laboratoryo.

p7

Sa buod

Bago magsagawa ng mga eksperimento sa PCR, ang pretreatment ng mga sample ay isang hindi maiiwasan at palaging sakit ng ulo para sa mga mananaliksik.Paano malutas ang problemang ito at kung ang mga eksperimento sa PCR ay maaaring isagawa nang walang paghihiwalay at pagkuha ng mga nucleic acid ay palaging iniisip ng karamihan ng mga siyentipikong mananaliksik at mga tauhan ng klinikal na laboratoryo.

Solusyon ni Foregene

Pagkatapos ng mga taon ng maingat na pananaliksik sa teknolohiya ng Direct PCR at mga kaugnay na kit, matagumpay na nalampasan ng Forgene ang maraming bottleneck at matagumpay na nakamit ang direktang PCR para sa maraming uri ng iba't ibang sample na may malakas na resistensya at kakayahang umangkop, na nagpapahintulot sa mga mananaliksik na alisin ang masalimuot at mapanganib na paghihiwalay at pagkuha ng mga nucleic acid.Ito ay lubos na magbabawas sa lakas ng paggawa ng lahat, magpapabilis sa proseso ng eksperimento, at makatipid sa mga gastos sa siyentipikong pananaliksik at pagsubok.

Ang pag-unawa at kaalaman ni Forgene sa DirectPCR

Una, ang teknolohiyang DirectPCR ay isang direktang teknolohiya ng PCR para sa iba't ibang biological sample tissues.Sa ilalim ng teknikal na kondisyong ito, hindi na kailangang paghiwalayin at kunin ang mga nucleic acid, at ang sample ng tissue ay direktang ginagamit bilang object, at ang mga target na gene primer ay idinagdag para sa PCR reaction.

Pangalawa, ang teknolohiya ng DirectPCR ay hindi lamang isang tradisyonal na teknolohiya ng amplification ng template ng DNA, ngunit kasama rin ang RNA template reverse transcription PCR.

Pangatlo, ang teknolohiya ng DirectPCR ay hindi lamang direktang gumaganap ng mga regular na qualitative na reaksyon ng PCR sa mga sample ng tissue, ngunit kasama rin ang Real-Time na mga reaksyon ng qPCR, na nangangailangan ng sistema ng reaksyon na magkaroon ng isang malakas na kakayahan upang labanan ang pagkagambala ng fluorescence sa background at upang labanan ang mga endogenous fluorescence quenchers.

Pang-apat, ang mga sample ng tissue na na-target ng teknolohiya ng DirectPCR ay nangangailangan lamang ng paglabas ng mga template ng nucleic acid at hindi nag-aalis ng mga protina, polysaccharides, salt ions, atbp. na nakakasagabal sa reaksyon ng PCR.Nangangailangan ito ng nucleic acid polymerase at PCR Mix sa sistema ng reaksyon upang magkaroon ng mahusay na anti-reversibility at adaptability, at masisiguro ang aktibidad ng enzyme at katumpakan ng pagtitiklop sa ilalim ng mga kumplikadong kondisyon.

Ikalima, ang mga sample ng tissue na na-target ng teknolohiya ng DirectPCR ay hindi sumailalim sa anumang paggamot sa pagpapayaman ng nucleic acid, at ang dami ng template ay napakaliit, na nangangailangan ng napakataas na sensitivity at kahusayan ng amplification ng sistema ng reaksyon.

Konklusyon

Ang teknolohiya ng DirectPCR ay isa sa pinakamahalagang pag-unlad at pagbabago sa teknolohiya sa nakalipas na 30 taon mula nang ipanganak ang teknolohiya ng PCR.Forgene ay mayroon at patuloy na magiging isang pioneer at innovator ng teknolohiyang ito.

Ang inaasahang aplikasyon ng teknolohiya ng DirectPCR ay napakalawak.Ang patuloy na pagpapabuti at pagsulong ng teknolohiyang ito ay tiyak na magdadala ng mga subersibong pagbabago sa siyentipikong pananaliksik at gawaing inspeksyon.Ito ay isang PCR technology revolution.


Oras ng post: Peb-21-2017