Ang hot-start Taq enzyme ay malawakang ginagamit.Kung ikukumpara sa ordinaryong DNA polymerase, ang hot-start na Taq enzyme ay mabisang makakaiwas sa ilang di-tiyak na amplification at sa pagbuo ng mga primer dimer, at mabisang mapapabuti ang success rate ng target gene amplification.Lalo na sa larangan ng genetic testing, ang hot-start na Taq enzyme ay natukoy bilang mandatoryong pamantayan sa industriya, at hindi dapat gamitin ang ordinaryong DNA polymerase.Tulad ng makikita mula sa itaas, ang mga hot-start na Taq enzyme ay malawakang ginagamit.Sa kasalukuyan, maraming brand ng hot-start Taq enzymes sa domestic market, ngunit walang maraming hot-start Taq enzymes na may mataas na kalidad.Nahaharap sa napakaraming mainit na panimulang produkto ng Taq enzyme, paano tayo pipili?

1. Piliin ang hot-start na Taq enzyme na may mataas na kahusayan sa amplification

Ang kahusayan ng PCR amplification ay malapit na nauugnay sa pagganap ng Taq enzyme.Matapos ang isang mahusay na sistema ng reaksyon ng Taq enzyme ay na-optimize, ang kahusayan ng amplification ay higit sa 95%, at ang saklaw ng amplification ng paunang halaga ng template ay malawak.Maaaring makuha ang kasiya-siyang amplification kapag mababa ang nilalaman ng target na gene, at hindi madaling malason kapag mataas ang halaga ng template, at mahaba ang exponential amplification period.Para sa Taq enzyme na may mahinang pagganap, kahit na ang sistema ng reaksyon ay na-optimize nang maraming beses, ang kahusayan ng amplification ay mas mababa pa sa 90%, ang hugis ng "S" ng amplification curve ay hindi halata, ang slope ay maliit, at ang curve ay flat.Kapag ang halaga ng template ay mababa, hindi ito maaaring palakihin, at kapag ang halaga ng template ay mataas, ang amplification effect ay hindi perpekto.Samakatuwid, ang pagpili ng mga polymerases ng DNA na may mataas na kahusayan sa pagpapalakas ay mahalaga sa tagumpay ng PCR at qPCR.

2. Piliin ang hot-start na Taq enzyme na may malakas na enzyme power

Ang lakas ng enzymatic ng Taq enzyme ay nauugnay sa kahusayan ng amplification.Sa pangkalahatan, mas malakas ang enzymatic power ng hot-start Taq enzyme, mas mahaba ang exponential growth period ng PCR amplification, mas tipikal na 'S-shaped' na curve, mas mataas ang fluorescence signal value, at mas angkop para sa multiplex PCR detection.Ang brand DNA polymerases na may mahinang enzymatic power ay karaniwang sumusuporta lamang sa 2-plex na reaksyon.Kapag gumagawa ng 3-plex reactions, mababa ang amplification curve, mababa ang fluorescence signal value, at walang tipikal na amplification curve, kaya mahirap husgahan ang mga resulta.

3. Pumili ng isang hot-start na Taq enzyme na may mataas na sensitivity

Sa pangkalahatan, ang DNA polymerase ay may mataas na kahusayan sa amplification at mataas na sensitivity, ngunit mayroon ding mga hindi pagkakapare-pareho.Kung mababa ang target na gene abundance ng sample na palakasin, inirerekomenda na subukan ang sensitivity ng amplification ng Taq enzyme.Ang pinakakaraniwang paraan ng pagtuklas ay ang magsagawa ng 10-tiklop o 5-tiklop na gradient dilution ng target na gene plasmid fragment, magsagawa ng PCR detection sa mas mababang dilution, at piliin ang hot-start na Taq enzyme na may mas mataas na sensitivity ng detection.

Makikita mula sa itaas na ang mga mananaliksik ay kailangang pumili ayon sa kanilang sariling mga pang-eksperimentong pangangailangan at kondisyon ng pagpopondo.Pinakamainam na gumawa ng gradient dilution amplification experiment upang makita ang kahusayan sa amplification at sensitivity ng hot-start na Taq enzyme.

Isang halimbawa ng Foregene's Taq DNA Polymerase:

Foreasy HS Taq DNA Polymerase

Paglalarawan

Ang Foreasy HS Taq DNA Polymerase ay isang DNA polymerase na ipinahayag sa Escherichia coli engineering bacteria sa pamamagitan ng teknolohiya ng gene recombination.Ang enzyme ay pinagsama sa isang natatanging buffffer ng reaksyon, na ginagawang lubos na lumalaban at magkatugma ang produkto, at maaaring direktang gamitin ang sample lysate (Foregene Lysis system) bilang isang template para sa mga reaksyon ng pagtuklas.

Aplikasyon

Qualitative PCR at quantitative PCR detection ng mga na-purify na template at hindi na-purify na mga template.

Quality Control

1.Walang nakitang aktibidad ng exogenous nuclease

2.PCR na paraan upang makita ang natitirang genomic DNA na walang host

3. Mabisa nitong palakasin ang mga single-copy na gene sa Genome ng tao

4. Mag-imbak sa temperatura ng silid sa loob ng isang linggo, hindi kapani-paniwalang mga pagbabago sa aktibidad

Mga detalye ng produkto: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/