Panimula:

Ang mga molekula ng RNA ay maaaring makipag-ugnayan nang husto sa iba pang mga biyolohikal na molekula, tulad ng protina, DNA at RNA, at sa gayon ay umiiral sa mga selula at organismo sa anyo ng mga macromolecular complex.Kabilang sa mga ito, ang RNA-protein complexes ay ang pagkakaroon at pag-andar ng RNA Isa sa mga mahalagang anyo ng.Ang RNA pull-down ay isang klasikong pamamaraan para sa pag-screen at pagtukoy ng mga molekula ng RNA, lalo na ang mga nakikipag-ugnayang protina ng mga molekula ng lncRNA, at kinikilala ng karamihan ng mga mananaliksik at internasyonal na may awtoridad na mga akademikong journal.Ngayon ay ibabahagi sa iyo ng FORREGENE ang eksperimentong prinsipyo at teknikal na proseso ng RNA pull-down, baka magagamit mo ito

1. Ang eksperimentong prinsipyo ng RNA pull down na teknolohiya:

In vitro transcription at synthesis ng biotin-labeled target lncRNA o lncRNA fragment (kabilang ang RNA fragment na ginamit bilang positibo at negatibong kontrol), at incubate gamit ang mga cell extract;gumamit ng avidin-anchored magnetic beads upang mangolekta ng RNA-protein o RNA-RNA complexes, Pagkatapos ng masusing paghuhugas, ang complex ay na-eluted.Kung nakita ang target na molekula ng protina na nakikipag-ugnayan sa lncRNA, magsagawa ng electrophoresis ng protina sa produktong RNA-pull down, tuklasin ang target na protina sa pamamagitan ng paglamlam ng pilak, at gupitin ang gel para sa mass spectrometry;direkta ring magsagawa ng western blot verification sa pull-down na produkto;kung matukoy Para sa mga target na molekula ng RNA na nakikipag-ugnayan sa lncRNA, ang mga produktong RNA-pull down ay sasailalim sa RNA extraction at isinasagawa ang partikular na qRT-PCR detection.

2. Proseso ng eksperimento sa teknolohiyang pull down ng RNA:

3. Teknikal na serbisyo para sa RNA pull down ng FOREGENE:

Kultura ng cell

Paghahanda ng cell total/nuclear/plasma protein extract

RNA pull down na eksperimento

SDS-PAGE electrophoresis, mantsa ng pilak

Mass spectrometry at mga eksperimento sa WB

Pang-eksperimentong ulat

4. Pang-eksperimentong kaso

Ang sumusunod na figure ay nagpapakita ng mga resulta ng FJ Bio-Bio's RNA pull down at SDS-PAGE electrophoresis detection, kung saan ang pulang arrow ay nagmamarka ng difference band:

Ang pangkat ng pananaliksik ni Propesor Song Xu ng Sichuan University ay nakaipon ng 15 taon ng pangmatagalang akumulasyon sa larangan ng lncRNA research.Nagtulungan ang Foregene Bio at ang research group ni Professor Song Xu para ilunsad ang RNA pull down na teknolohiya ng lncRNA, na magbibigay sa iyo ng kasiya-siyang resulta para sa iyong eksperimento.