Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (walang Sampling Tools) Protocol
Paglalarawan ng Kit:
Direktang gamitin ang animal tissue lysate bilang template para sa PCR amplification, nang walang hiwalay na pagkuha ng DNA, mabilis at mataas ang sensitivity.Nagdagdag ng UNG anti-pollution system para maalis ang mga maling positibo.
◮Walang kinakailangang oras at mahal na paglilinis ng DNA.
◮Maliit lang ang sample demand, kumuha lang ng isang binhi.
◮Walang mga espesyal na paggamot tulad ng paggiling at pagdurog ay kinakailangan, at ang operasyon ay simple.
◮Ang na-optimize na PCR system ay nagbibigay-daan sa PCR na magkaroon ng mas mataas na specificity at mas malakas na tolerance sa PCR reaction inhibitors.
Mga paglalarawan
Gumagamit ang kit na ito ng kakaibang lysis buffer system upang mabilis na mailabas ang genomic DNA mula sa mga sample ng tissue ng hayop para sa mga reaksyon ng PCR, kaya ito ay partikular na angkop para sa malakihang genetic testing.
Ang proseso ng paglabas ng genomic DNA mula sa lysis buffer ay nakumpleto sa loob ng 10-30 minuto sa 65°C.Walang ibang proseso tulad ng pag-alis ng protina at RNA ang kinakailangan, at ang inilabas na trace DNA ay maaaring gamitin bilang template para sa reaksyon ng PCR.
2×PCR EasyTMGumagamit ang Mix (UNG) ng dUTP sa halip na dTTP batay sa 2×PCR EasyTMPaghaluin, at idagdag ang UNG enzyme (Uracil-N-glycosylase) na maaaring pababain ang template na naglalaman ng dUTP sa parehong oras.Bago ang reaksyon ng PCR, ang UNG enzyme ay ginagamit upang pababain ang produkto ng PCR na naglalaman ng uracil.Ang UNG enzyme ay hindi magkakaroon ng anumang epekto sa template na hindi naglalaman ng uracil, sa gayon ay tinitiyak ang pagiging tiyak at katumpakan ng amplification at pinipigilan ang posibilidad ng kontaminasyon ng mga produkto ng PCR sa panahon ng malakihang genetic testing.
Ang D-Taq DNA polymerase ay isang DNA polymerase na espesyal na binuo ng Foregene para sa mga direktang reaksyon ng PCR.Ang D-Taq DNA polymerase ay may malakas na tolerance sa iba't ibang PCR reaction inhibitors, at mahusay na nakakapagpalaki ng mga bakas na dami ng DNA sa iba't ibang kumplikadong sistema ng reaksyon, at ang bilis ng amplification ay maaaring umabot sa 2Kb/min, na kung saan ay angkop lalo na para sa Direct PCR reaction.
Mga bahagi ng kit
| Bahagi I | Buffer AL |
| Foregene Protease | |
| 6× DNA Loading Buffer | |
| Bahagi II | 2×PCR EasyTMMix(UNG) |
Mga tampok at kalamangan
■Walang nakakaubos ng oras at mamahaling DNA purification
■ Maliit ang sample demand, kasing liit ng 5mg tissue ng hayop ang masusuri.
■ Walang kinakailangang espesyal na paggamot tulad ng paggiling at pagdurog, at ang operasyon ay simple.
■ Dahil sa na-optimize na PCR system, ang PCR ay may mas mataas na espesipiko at mas malakas na tolerance sa PCR reaction inhibitors.
■ Anti-pollution PCR system 2×Madaling PCRTMAng Mix (UNG) ay epektibong nag-aalis ng polusyon na dulot ng mga produkto ng PCR at tinitiyak ang pagiging tiyak at katumpakan ng amplification.
Mga parameter ng kit
Paglalapat: iba't ibang mga tisyu ng hayop.
Inilabas ang DNA mula sa sample lysis: ginamit lang bilang PCR template.
Maaaring gamitin ang kit para sa mga sumusunod na layunin: pagkilala sa transgenosis, genotyping ng hayop, atbp.
Daloy ng trabaho
Imbakan at buhay ng istante
Ang Bahagi I ng kit na ito ay dapat na nakaimbak sa 2-8℃.
Ang reagent Buffer AL ay maaaring itago sa loob ng 12 buwan sa ilalim ng mga tuyong kondisyon;maaari itong maimbak sa 2-8℃para sa mas mahabang imbakan.
Ang Reagent Foregene Protease ay may natatanging formula.Upang matiyak ang aktibidad at katatagan nito, mangyaring itabi ito sa 4℃sa loob ng 12 buwan.
Reagent 6×Ang DNA Loading Buffer ay maaaring maimbak sa 4℃o -20℃sa mahabang panahon.
Ang Bahagi II ng kit na ito ay dapat na nakaimbak sa -20℃.
Reagent 2×Madaling PCRTMMix(UNG), kung ito ay madalas na ginagamit, maaari rin itong itabi sa 4℃para sa panandaliang imbakan (gamitin sa loob ng 10 araw).
