Kit ng Pagbubukod ng RNA ng Dugo
Paglalarawan ng Kit:
Pusa.Hindi.RE-04011/04013
Para sa kabuuang paglilinis ng RNA mula sa buong dugo 104 ≤ Mga White Blood Cell ≤ 107
Mabilis na ihiwalay at linisin ang RNA ng dugo mula sa mga puting selula ng dugo.
-Hindi na kailangang mag-alala tungkol sa pagkasira ng RNA.Ang buong kit ay RNase-Free
-Simple—lahat ng operasyon ay nakumpleto sa room temperature
-Mabilis—maaaring makumpleto ang operasyon sa loob ng 20 minuto
-Mataas na RNA yield: RNA-only Column at natatanging formula ay maaaring mahusay na maglinis ng RNA
-Ligtas—walang ginagamit na organikong reagent
-Malaking kapasidad sa pagpoproseso ng sample—hanggang sa 200μl na mga sample ang maaaring iproseso sa bawat oras.
-Mataas na kalidad—ang purified RNA ay lubos na dalisay, walang protina at iba pang mga dumi, at maaaring matugunan ang iba't ibang mga pang-eksperimentong aplikasyon sa ibaba ng agos.
Mga paglalarawan
Ang kit ay gumagamit ng spin column at formula na binuo ng aming kumpanya, na mahusay na nakakakuha ng mataas na kadalisayan at mataas na kalidad na kabuuang RNA mula sa anticoagulated whole blood.Ang kit ay nagbibigay ng red blood cell lysate (Buffer RCL), na mabilis at mahusay na makakapag-lyse ng mga pulang selula ng dugo at makapagpapanatili ng mga puting selula ng dugo.Ang mahusay na DNA-Cleaning Colunm ay madaling paghiwalayin ang supernatant at cell lysates at i-adsorb at alisin ang genomic DNA.Ang operasyon ay simple at nakakatipid ng oras;Ang RNA-only Column ay mahusay na makakapagbigkis ng RNA, at sa isang natatanging formula, maaari itong magproseso ng malaking bilang ng mga sample sa parehong oras.
Ginagawa ng buong sistema na RNase-Free ang na-extract na RNA na hindi nabubulok;Ginagawa ng Buffer RW1 at Buffer RW2 buffer washing system ang nakuhang RNA na walang protina, DNA, mga ion at organic compound na polusyon.
Mga Nilalaman ng Kit
| Blood Total RNA Isolation Kit | ||
| Komposisyon ng kit | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 beses | 200 beses | |
| Buffer RCL (10×) | 52.5 ML | 210mL |
| Buffer BRL1* | 30mL | 120mL |
| Buffer BRL2 | 18mL | 66mL |
| Buffer RW1* | 25mL | 100mL |
| Buffer RW2 | 24mL | 96mL |
| RNase-Free ddH2 O | 10mL | 40mL |
| RNA-only na Column | 50 set | 200 set |
| Hanay ng Paglilinis ng DNA | 50 set | 200 set |
| manwal | 1 kopya | 1 kopya |
Mga tampok at kalamangan
-Hindi na kailangang mag-alala tungkol sa pagkasira ng RNA.Ang buong kit ay RNase-Free.
-Simple—lahat ng operasyon ay nakumpleto sa room temperature.
-Mabilis—maaaring makumpleto ang operasyon sa loob ng 20 minuto.
-Mataas na RNA yield: Ang RNA-only na Column at natatanging formula ay maaaring mahusay na maglinis ng RNA.
-Ligtas—walang ginagamit na organikong reagent.
-Malaking kapasidad sa pagpoproseso ng sample—hanggang sa 200μl na mga sample ang maaaring iproseso sa bawat oras.
-Mataas na kalidad—ang purified RNA ay lubos na dalisay, walang protina at iba pang mga dumi, at maaaring matugunan ang iba't ibang mga pang-eksperimentong aplikasyon sa ibaba ng agos.
Mga parameter ng kit
Application ng kit:
Ito ay angkop para sa pagkuha at paglilinis ng kabuuang RNA mula sa buong dugo ng mammalian.
Daloy ng trabaho
Mga kondisyon ng imbakan
Ang buffer RCL (10×) ay dapat na naka-imbak sa 2-8 ℃ ;Ang iba pang mga bahagi ng kit ay maaaring itago sa temperatura ng silid (15-25 ℃) sa ilalim ng mga tuyong kondisyon, at maaaring iimbak ng 12 buwan.Ang buffer BRL1 ay maaaring maimbak sa 4 ℃ sa loob ng 1 buwan pagkatapos magdagdag ng β-mercaptoethanol (opsyonal) .
Tandaan: Kung nakaimbak sa mababang temperatura, ang solusyon ay madaling kapitan ng pag-ulan.Siguraduhing ilagay ang solusyon sa kit sa temperatura ng silid sa loob ng ilang oras bago gamitin.Kung kinakailangan, painitin ito sa isang 37° C na paliguan ng tubig sa loob ng 10 minuto upang matunaw ang namuo, at haluing mabuti bago gamitin.
Mga gabay para sa pagsusuri ng mga problema
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Walang RNA ang maaaring makuha o mababa ang ani ng nucleic acid
Karaniwang maraming salik ang nakakaapekto sa kahusayan sa pagbawi, gaya ng: sample na nilalaman ng RNA, paraan ng pagpapatakbo, dami ng elution, atbp.
Pagsusuri ng mga karaniwang sanhi:
1. Ice bath o low-temperature (4 ° C) centrifugation sa panahon ng operasyon.
Mungkahi: Operasyon sa temperatura ng silid (15-25 ° C), hindi kailanman ice bath at low temperature centrifuge.
2. Hindi wastong pag-iimbak ng sample o pag-iimbak ng sample nang masyadong mahaba.
Mungkahi: Mag-imbak ng mga sample sa -80 ° C o mag-freeze sa likidong nitrogen, at iwasan ang paulit-ulit na paggamit ng freeze-thaw;subukang gumamit ng mga bagong nakolektang sample para sa RNA extraction.
3.Hindi sapat na sample lysis
Rekomendasyon: Pakitiyak na ang sample at ang gumaganang solusyon (Linear Acrylamide) ay lubusang pinaghalo at na-incubate sa loob ng 10 min sa temperatura ng silid (15-25 ° C)
4.Maling naidagdag ang eluent
Rekomendasyon: Tiyaking idinaragdag ang RNase-Free ddH2O sa gitna ng lamad ng column ng purification
5. Hindi wastong dami ng anhydrous ethanol sa Buffer viRW2
Mungkahi: Mangyaring sundin ang mga tagubilin, idagdag ang tamang dami ng anhydrous ethanol sa Buffer viRW2 at ihalo nang mabuti ang mga ito bago gamitin ang kit.
6. Hindi wastong paggamit ng sample.
Mungkahi: 200µl ng sample bawat 500μl ng Buffer viRL.Ang sobrang dami ng sample ay magreresulta sa pagbawas ng rate ng pagkuha ng RNA.
7. Hindi wastong dami ng elution o hindi kumpletong elution.
Mungkahi: Ang eluent volume ng purification column ay 30-50μl;kung hindi kasiya-siya ang elution effect, inirerekomendang magdagdag ng pre-heated RNase-Free ddH2O at pahabain ang oras ng paglalagay sa temperatura ng silid, tulad ng 5-10min
8. Ang column ng purification ay may nalalabi na ethanol pagkatapos banlawan sa Buffer viRW2.
Mungkahi: Kung nananatili pa rin ang ethanol pagkatapos banlawan sa Buffer viRW2 at empty-tube centrifugation sa loob ng 2min, ang purification column ay maaaring iwan sa room temperature ng 5min pagkatapos ng empty-tube centrifugation upang ganap na maalis ang natitirang ethanol.
Ang pagkasira ng purified RNA molecules
Ang kalidad ng purified RNA ay nauugnay sa mga salik tulad ng sample storage, RNase contamination, at operasyon.
Pagsusuri ng mga karaniwang sanhi:
1. Ang mga nakolektang sample ay hindi na-save sa oras.
Mungkahi: Kung ang sample ay hindi ginamit sa oras pagkatapos ng koleksyon, mangyaring itabi ito kaagad sa -80 ℃ o liquid nitrogen.Para sa pagkuha ng mga molekula ng RNA, subukang gumamit ng mga bagong nakolektang sample hangga't maaari.
2. Ang mga nakolektang sample ay nagyeyelo at natunaw nang paulit-ulit.
Mungkahi: Iwasan ang paulit-ulit na pagyeyelo at lasaw (hindi hihigit sa isang beses) sa panahon ng pagkolekta at pag-iimbak ng sample, kung hindi ay bababa ang ani ng nucleic acid.
3. Ang RNase ay ipinakilala sa operating room o walang mga disposable gloves, mask, atbp. ang isinuot.
Mungkahi: Ang pagkuha ng RNA molecules eksperimento ay pinakamahusay na ginanap sa isang hiwalay na RNA operation room, at ang experimental table ay nililinis bago ang eksperimento.Magsuot ng mga disposable gloves at mask sa panahon ng eksperimento upang maiwasan ang pagkasira ng RNA na dulot ng pagpapakilala ng RNase.
4. Ang reagent ay kontaminado ng RNase habang ginagamit.
Mungkahi: Palitan ng bagong Viral RNA Isolation Kit para sa mga kaugnay na eksperimento.
5. Ang kontaminasyon ng RNase ng mga centrifuge tube, pipette tip, atbp. Mungkahi: Siguraduhin na ang centrifuge tubes, pipette tip, at pipette ay lahat ay RNase-Free.
Naapektuhan ng mga purified RNA molecule ang mga eksperimento sa ibaba ng agos
Ang mga molekula ng RNA na pinadalisay ng column ng purification ay makakaapekto sa mga eksperimento sa ibaba ng agos kung mayroong masyadong maraming salt ions o protina, tulad ng: reverse transcription, Northern Blot, atbp.
1. May mga natitirang salt ions sa mga eluted RNA molecules.
Rekomendasyon: Siguraduhin na ang tamang dami ng anhydrous ethanol ay naidagdag sa Buffer viRW2, at hugasan ang purification column nang dalawang beses ayon sa tamang centrifugation speed sa mga tagubilin sa pagpapatakbo; Kung may natitira pang mga salt ions, maaari mong idagdag ang Buffer viRW2 sa purification column, at iwanan ito sa temperatura ng kuwarto sa loob ng 5min.Pagkatapos ay magsagawa ng centrifugation upang alisin ang kontaminasyon ng mga ion ng asin sa pinakamaraming lawak
2. May mga natitirang ethanol sa eluted RNA molecules
Mungkahi: sa sandaling makumpirma na ang mga column ng purification ay nahugasan na ng Buffer viRW2, magsagawa ng empty-tube centrifugation ayon sa centrifugal speed sa mga tagubilin sa pagpapatakbo.Kung may natitira pang ethanol, maaari itong iwanan ng 5 minuto sa temperatura ng silid pagkatapos ng sentrifugasyon na walang laman ang tubo upang maalis ang natitirang ethanol sa pinakamalawak na lawak.
Mga Manwal ng Pagtuturo:
Viral RNA Isolation Kit Instruction Manual
