Plant DNA Isolation Kit Genomic Plant DNA Purification Kits Reagents Protocol
Mga pagtutukoy
50 Preps, 100 Preps, 250 Preps
Gumagamit ang kit na ito ng column na DNA-only na maaaring partikular na magbigkis ng DNA, Foregene protease at isang natatanging buffer system, na lubos na nagpapasimple sa purification ng genomic DNA ng halaman.Ang de-kalidad na genomic DNA ay maaaring makuha sa loob ng 30 minuto, na maiwasan ang pagkasira ng genomic DNA.
Ang DNA-only na silica gel membrane na ginamit sa spin column ay ang natatanging bagong materyal ng Foregene, na maaaring epektibo at partikular na makakapag-bind sa DNA, at mapakinabangan ang pag-alis ng RNA, mga impurity protein, ions, polysaccharides, polyphenols at iba pang mga organic compound.
Mga bahagi ng produkto
| Buffer PL1, Buffer PL2 |
| Buffer PW, Buffer WB, Buffer EB |
| Foregene Protease |
| DNA-Only Column |
| Mga tagubilin |
Mga tampok at kalamangan
■ Walang kontaminasyon ng RNase: Ginagawang posible ng DNA-Only Column na ibinigay ng kit na alisin ang RNA mula sa genomic DNA nang walang karagdagang RNase sa panahon ng eksperimento, na pumipigil sa laboratoryo na mahawa ng exogenous RNase.
■ Mabilis na bilis: Ang Foregene Protease ay may mas mataas na aktibidad kaysa sa mga katulad na protease at mas mabilis na natutunaw ang mga sample ng tissue.
■ Simple: ang operasyon ng pagkuha ng genomic DNA ay maaaring makumpleto sa loob ng 30 minuto.
■ Maginhawa: Ang centrifugation ay ginagawa sa room temperature, walang 4℃ low-temperature centrifugation o ethanol precipitation ng DNA ang kinakailangan.
■ Kaligtasan: walang kinakailangang organikong reagent.
■ Mataas na kalidad: Ang purified genomic DNA ay may malalaking fragment, walang RNA, walang RNase, at napakababang nilalaman ng ion, ay maaaring matugunan ang mga kinakailangan ng iba't ibang mga eksperimento.
Application ng kit
Angkop para sa pagkuha at paglilinis ng genomic DNA mula sa sariwa o frozen na mga tisyu ng halaman.
Daloy ng trabaho
Diagram
Imbakan at buhay ng istante
Ang kit ay maaaring iimbak ng 12 buwan sa temperatura ng silid (15–25 ℃) at 2–8 ℃ para sa mas mahabang panahon.
Ang solusyon ng Foregene Protease Plus ay may kakaibang formula, na aktibo kapag nakaimbak sa temperatura ng silid nang mahabang panahon (3 buwan);ang aktibidad at katatagan nito ay magiging mas mahusay kapag naka-imbak sa4 ℃, kaya inirerekomenda na iimbak ito sa 4 ℃, tandaan na huwag mag-imbak sa -20 ℃.
Gabay sa Pagsusuri ng Suliranin
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Mababang ani o walang DNA
Karaniwang maraming salik na nakakaapekto sa ani ng genomic DNA, kabilang ang pinagmulan ng sample, ang edad ng sample, ang mga kondisyon ng imbakan ng sample, at ang operasyon.
Ang genomic DNA ay hindi makuha sa panahon ng pagkuha
1. Ang mga sample ng tissue ay hindi wastong nakaimbak o nakaimbak nang masyadong mahaba, na nagreresulta sa pagkasira ng genomic DNA.
Rekomendasyon: Itago ang mga sample ng tissue sa likidong nitrogen o -20°C;subukang gumamit ng mga bagong nakolektang sample para sa genomic DNA extraction.
2. Masyadong maliit na sample na halaga ay maaaring maging sanhi ng kaukulang genomic DNA upang hindi makuha.
Mungkahi: Para sa mga sample ng tissue na matagal nang nakaimbak o may malubhang pagkasira ng genomic DNA, ang dami ng mga sample ng tissue ay maaaring angkop na dagdagan upang makakuha ng malaking genomic DNA.Ang dami ng sample ay maaaring matukoy ayon sa mga pangangailangan ng DNA, ngunit ang sariwang sample ay hindi dapat lumampas sa 100mg, at ang dry sample ay hindi dapat lumampas sa 30mg.
3. Ang sample ay hindi giniling na may likidong nitrogen o inilagay nang masyadong mahaba pagkatapos ng likidong nitrogen.
Mungkahi: Sa panahon ng pagkuha ng DNA, ang sample ay kailangang ganap na dinurog ng likidong nitrogen upang masira ang cell wall;pagkatapos ng paggiling, mangyaring ilipat ang sample na pulbos sa PL1 na preheated sa 65°C sa lalong madaling panahon (kapag ang ground powder ay natunaw, ang genomic DNA ay magsisimula nang mabilis na masira) .
4. Ang hindi wastong pag-iimbak ng Foregene Protease ay nagreresulta sa pagbawas o hindi aktibo na aktibidad.
Rekomendasyon: Kumpirmahin ang mga kondisyon ng imbakan ng Foregene Protease o palitan ito ng bagong Foregene Protease para sa enzymatic hydrolysis.
5. Ang kit ay hindi wastong nakaimbak o nakaimbak nang masyadong mahaba, na nagiging sanhi ng ilang bahagi sa kit na mabigo.
Rekomendasyon: Bumili ng bagong plant genomic DNA extraction kit para sa mga kaugnay na operasyon.
6. Hindi wastong paggamit ng kit.
Mungkahi: Bumili ng Plant DNA Isolation Kit na nakatuon sa mga sample para sa pagkuha at paglilinis ng genomic DNA ng halaman.
7. Buffer WB nang walang pagdaragdag ng awalang tubig ethanol.
Rekomendasyon: Tiyaking idagdag ang tamang dami ng absolute ethanol sa Buffer WB.
8. Ang eluent ay hindi naipatak ng tama sa silica membrane.
Mungkahi: Idagdag ang pre-heated eluent sa 65℃dropwise sa gitna ng silica gel membrane, at iwanan ito sa temperatura ng silid sa loob ng 5 minuto upang mapataas ang kahusayan ng elution.
Extraction para makakuha ng low-yield genomic DNA
1. Ang sample ay hindi wastong nakaimbak o nakaimbak nang masyadong mahaba, na nagreresulta sa pagkasira ng genomic DNA.
Rekomendasyon: Mag-imbak ng mga sample ng tissue sa -20℃;subukang gumamit ng mga bagong nakolektang sample ng tissue para sa genomic DNA extraction.
2. Kung ang dami ng mga sample ng tissue ay masyadong maliit, ang nakuhang genomic DNA ay magiging mas kaunti.
Mungkahi: Ang ilang mga sample ng halaman ay mayaman sa tubig, tulad ng mga aquatic na halaman tulad ng algae, atbp., ang dosis ay maaaring naaangkop na taasan o ang tubig ay maaaring ma-dehydrate ng kaunti bago ang operasyon.
3. Ang mga sample ay hindi lubusang giniling na may likidong nitrogen o iniwan sa temperatura ng silid nang masyadong mahaba pagkatapos ng paggiling.
Mungkahi: Ang paggiling ng likidong nitrogen ay dapat sapat, at ang sample na pader ng cell ay dapat masira hangga't maaari;kaagad pagkatapos ng paggiling, ang sample na pulbos ay dapat ilipat sa 65℃preheated Buffer PL1 para sa susunod na hakbang.
4. Hindi gumagamit ng tamang kit.
Rekomendasyon: Gumamit ng nakalaang Plant DNA Isolation Kit upang kunin at linisin ang genomic DNA ng halaman.
5. Ang hindi wastong pag-iimbak ng Foregene Protease ay nagreresulta sa pagbawas o hindi aktibo na aktibidad.
Rekomendasyon: Kumpirmahin ang mga kondisyon ng imbakan ng Foregene Protease o palitan ito ng bagong Foregene Protease para sa enzymatic hydrolysis.
6. Mahusay na problema
Rekomendasyon: Mangyaring gamitin ang Buffer EB para sa elution;kung gumagamit ng ddH2O o iba pang eluent, siguraduhin na ang pH ng eluent ay nasa pagitan ng 7.0-8.5.
7. Ang eluent ay hindi tumulo ng tama
Mungkahi: Mangyaring idagdag ang elution drop sa gitna ng silica membrane at iwanan ito sa temperatura ng silid sa loob ng 5 minuto upang mapataas ang kahusayan ng elution.
8. Masyadong maliit ang eluent volume
Mungkahi: Mangyaring gamitin ang eluent para sa genomic DNA elution ayon sa mga tagubilin, hindi bababa sa 100μl.
Extracted genomic DNA na may mababang kadalisayan
Ang mababang kadalisayan ng genomic DNA ay hahantong sa pagkabigo o hindi magandang epekto ng mga eksperimento sa ibaba ng agos, tulad ng: hindi maputol ang enzyme, at hindi makukuha ng PCR ang target na fragment ng gene.
1. Miscellaneous protein contamination, RNA contamination.
Pagsusuri: Hindi ginamit ang Buffer PW para hugasan ang column;Ang buffer PW ay hindi ginamit upang hugasan ang haligi sa tamang bilis ng sentripugasyon.
Mungkahi: subukang tiyakin na walang pag-ulan sa supernatant kapag ang supernatant ay dumaan sa column;siguraduhing hugasan ang column ng purification gamit ang Buffer PW ayon sa mga tagubilin, at hindi maaaring tanggalin ang hakbang na ito.
2. Impurity ion polusyon.
Pagsusuri: Ang Buffer WB wash column ay tinanggal o isang beses lang nahugasan, na nagreresulta sa natitirang ionic na kontaminasyon.
Rekomendasyon: Siguraduhing maghugas ng dalawang beses gamit ang Buffer WB ayon sa mga tagubilin upang alisin ang mga natitirang ions hangga't maaari.
3. Kontaminasyon ng RNase.
Pagsusuri: Ang Exogenous RNase ay idinagdag sa Buffer;Ang maling operasyon sa paghuhugas sa Buffer PW ay magreresulta sa natitirang RNase at makakaapekto sa mga pang-eksperimentong operasyon ng RNA sa ibaba ng agos, gaya ng in vitro transcription.
Mungkahi: Ang mga foregene series na nucleic acid extraction kit ay maaaring mag-alis ng RNA nang walang karagdagang RNase, at lahat ng reagents sa Plant DNA Isolation Kit ay hindi nangangailangan ng RNase;siguraduhing hugasan ang column ng purification gamit ang Buffer PW ayon sa mga tagubilin, at hindi maaaring tanggalin ang hakbang na ito.
4. Mga nalalabi sa ethanol.
Pagsusuri: Pagkatapos hugasan ang column ng purification gamit ang Buffer WB, walang isinagawa na centrifugation ng walang laman na tube.
Rekomendasyon: Sundin ang mga tagubilin para sa wastong walang laman na tube centrifugation.
Manwal ng Pagtuturo:
Manwal ng Pagtuturo sa Plant DNA Isolation Kit
