Direktang RT-qPCR Kit
Paglalarawan ng Kit:
◮ Direktang RT-qPCR Kit, gamit ang Foreasy Reverse Transcriptase at Foreasy HS Taq DNA Polymerase na binuo ni Foregene, na may natatanging buffer ng reaksyon, ang kit na ito ay may malakas na resistensya at compatibility, at maaari nitong direktang subukan ang reaksyon gamit ang Foregene Lysis system bilang template.Maaaring mag-apply ang kit na ito para sa COVID-19 nucleic acid detection kit at iba pang pathogenic bacteria na pagbuo ng nucleic acid detection kit.
Paglalarawan
Ang Direct RT-qPCR Kit ay nagbibigay ng hiwalay na nakabalot na RT-qPCR buffer at mataas na mahusay na enzymepinaghalong (Taq, M-MLV, RI), ginagawa itong maginhawa para sa paglikha ng mga back-end kit at systempagsasaayos，sa loob ng simpleng pag-verify.
Mga pagtutukoy
500T, 50,000T
Mga bahagi ng kit
| Mga nilalaman ng kit (20 μL na sistema ng reaksyon) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Direktang Pinaghalong Enzyme | 500 μL×1 | 50 ML×1 |
| 2× Direktang RT-qPCR Buffer | 1 mL×5 | 500 ML×1 |
| Pagtuturo | 1 | 1 |
Mga Hakbang sa Pagpapatakbo
Bago ang paghahanda ng reagent, ang lahat ng mga reagents sa kit ay dapat na lasaw sa temperatura ng silid at malumanay na halo.
A: Maghanda of template at reagent
1. Maghanda ng inihandang template ng RNA (Inirerekomendang gumamit ng Foregene Total RNA Isolation Kit series kit para i-extract at linisin ang template ng RNA) o sample ng cracking na produkto (Inirerekomendang gumamit ng Foregene Lysis system), mga partikular na primer(10 μM) at iba pang nauugnay na consumable, instrumento.
2. Ilagay ang 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O at 20× ROX Reference Dye(kung ito's kinakailangan) sa kahon na may yelo, na ginagawang natural na matunaw ang mga ito, at malumanay na hinahalo.
B: Maghanda of RT-qPCR sistema
mesa 1 : Maghanda of RT-qPCR system
| Component | Dami | Panghuling konsentrasyon |
| 2× Direktang RT-qPCR Buffer | 10 μL | 1× |
| Direktang Pinaghalong Enzyme | 1μL | |
| Forward Primer(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Baliktad na Primer(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Probe(4 μM) | 1μL | 200nM |
| Template(RNA o Lysate) | X μL | |
| 20×ROX Reference Dye | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Kabuuang Dami | 20μL |
C: Itakda ang RT-qPCR reaksyon programa
mesa 2 : RT-qPCR reaction programa setting (para sa halimbawa: dalawa-hakbang paraan)
| Hakbang | Temperatura | Oras | Mga cycle | Nilalaman | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Baliktad na transkripsyon |
| 2 | 95 ℃ | 1 min | 1 | Pre-denaturation | |
| 3 | 95 ℃ | 10 seg | 40-45 | Denaturasyon | |
| 60 ℃ | 30 segundo 2* | Anneal/Extension | |||
Imbakan at buhay ng istante
-Ang kit ay dapat na nakaimbak sa -20± 5℃.Ang panahon ng bisa ay 12 buwan.
-Iwasan ang paulit-ulit na freeze-thaw cycle (<5 cycle).
