ForeDirect RT-qPCR Kit
Paglalarawan ng Kit:
◮Para sa direktang real-time na amplification ng RNA mula sa mga koleksyon ng pamunas na walang mga proseso ng paglilinis ng RNA.Kinukumpleto ng kit na ito ang mga qRT-PCR cycle sa loob ng isang oras.Ang enzyme mix ay isang na-optimize na timpla ng Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor.Ang Reaction Buffer ay naglalaman ng lahat ng kinakailangang bahagi, kabilang ang mga na-optimize na bahagi ng buffer, Mg2+, dUTP, at dNTPs.
Paglalarawan
Ang ForeDirect RT-qPCR Kit ay idinisenyo para sa direktang real-time na amplification ng RNA mula sa mga koleksyon ng pamunas na walang mga proseso ng paglilinis ng RNA.Kinukumpleto ng kit na ito ang mga qRT-PCR cycle sa loob ng isang oras.Ang enzyme mix ay isang na-optimize na timpla ng Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor.Ang Reaction Buffer ay naglalaman ng lahat ng kinakailangang bahagi, kabilang ang mga na-optimize na bahagi ng buffer, Mg2+, dUTP, at dNTPs.
Mga pagtutukoy
100T
Mga bahagi ng kit
| Nucleic acid release agent |
| Proteksiyon ng RNA |
| 2× RT-qPCR Buffer |
| Pinaghalong Enzyme(Taq&M-MLV) |
| Mga tagubilin |
Aplikasyon ng PCR
1. Kapag ang PCR reaction tubes ay nai-centrifuge na, ilagay ang mga ito sa sample tank ng amplification instrument.
2. Thermal protocol
| Hakbang | Temperatura | Oras | Mga cycle | |
| 1 | Baliktad na transkripsyon | 50 ℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Pre-denaturation | 95 ℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Denaturasyon | 95 ℃ | 10 segundo | 42 |
| 4 | Anneal/Extension | 60 ℃ | 30 segundo | |
Tandaan:Ang fluorescent signal ay nakita kaagad pagkatapos ng extension step ng bawat cycle.
3. Pagkatapos ng setting, i-save ang file at patakbuhin ang reaction program.
Mga Hakbang sa Pagpapatakbo
Bago ang paghahanda ng reagent, ang lahat ng mga reagents sa kit ay dapat na lasaw sa temperatura ng silid at malumanay na halo.
Paghahanda ng reagent
1. Ihanda ang Nucleic Acid Release Mix
| Component | Dami bawat Sample o Kontrol |
| Nucleic acid release agent | 5μL |
| Proteksiyon ng RNA | 0.5 μL |
2. Ihanda ang Reaction Mix
| Component | Dami bawat Sample o Kontrol |
| 2× RT-qPCR Buffer | 15 μL |
| Pinaghalong Enzyme(Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| Mga panimulang aklat at Probe | 1μL |
Imbakan at buhay ng istante
-Ang kit ay dapat na nakaimbak sa -20± 5℃.Ang panahon ng bisa ay 12 buwan.
-Iwasan ang paulit-ulit na freeze-thaw cycle (<5 cycle).
