QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Paglalarawan ng Kit:
◮Ang natatanging PCR optimization system ay gumagawa ng 2×QuickEasyTMMas compatible ang Real PCR Mix-Taqman.
◮Ang hot-start na Foregene HS Taq Polymerase ay may mas mataas na kahusayan sa amplification, mas mataas na sensitivity ng amplification, at mas mataas na specificity ng amplification.
◮2× QuickEasyTMAng Real PCR Mix -Ang Taqman ay gumagamit ng isang natatanging system na na-optimize ng Foregene para pahusayin ang sensitivity at specificity ng sequence-specific probe detection, na magagamit para sa genotyping at copy number variation determination at makakuha ng mga tumpak na resulta.
◮Ang produktong ito ay may kasamang ROX internal reference dye, na maaaring gamitin para alisin ang signal background at signal error sa pagitan ng mga balon, na maginhawa para sa mga customer na gamitin sa iba't ibang uri ng quantitative PCR instruments.
Mga paglalarawan
Ang 2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman na ibinigay ng QuickEasyTMAng Real Time PCR Kit-Taqman kit ay isang bagong henerasyong master mix system na idinisenyo para sa Real Time PCR amplification reaction gamit ang mga partikular na fluorescent probe.Ang pangunahing Foregene HS Taq DNA Polymerase nito ay nakabatay sa pagbabago ng Antibody, na ginamit kasabay ng Foregene na karagdagang na-optimize na PCR system, ay may mas mataas na pagtitiyak at kahusayan sa amplification.Kung ikukumpara sa ordinaryong PCR mix, mayroon itong mas malakas na kakayahan sa amplification at mas mababang mismatch rate.Maaari itong magamit sa fluorescence quantitative PCR reaction upang bawasan ang hindi tiyak na amplification at pagbutihin ang katumpakan ng PCR.Maaari nitong lubos na mapabuti ang pagtitiyak ng produkto at pagiging sensitibo sa reaksyon.Kasabay nito, ang ROX ay ibinigay bilang panloob na reference dye.
Ang QuickEasyTMAng Real Time PCR Kit-Taqman kit ay may malawak na saklaw ng aplikasyon sa dami ng template, at maaaring makakuha ng magandang standard curve sa iba't ibang quantitative na rehiyon, at tumpak na mabibilang at matutukoy ang mga target na gene na may mahusay na repeatability at mataas na kumpiyansa.
Mga pagtutukoy
200 na paghahanda,500 na paghahanda,1000 na paghahanda,2000 Preps
Mga bahagi ng kit
| QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman(20μlsistema) | ||||
| Mga nilalaman ng kit | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 Preps | 500 Preps | 1000 Preps | 2000 Preps | |
| 2×MabilisMadaliTM Tunay na PCR Haluin-Taqman | 1 mL×2 | 1.7 ML×3 | 1.7 ML×6 | 1.7 ML×12 |
| 20×ROX Reference Dye | 200μL | 0.5 ML | 1 mL | 1 mL×2 |
| DNase-Free ddH2O | 1.7 ML | 1.7 ML×2 | 10 ML | 20 ML |
| KUNG IKAW | 1piraso | 1piraso | 1piraso | 1piraso |
Mga tampok at kalamangan
■ Ang natatanging PCR optimization system ay gumagawa ng 2×QuickEasyTMMas compatible ang Real PCR Mix-Taqman.
■ Ang Hot-start na Foregene HS Taq Polymerase ay may mas mataas na kahusayan sa amplification, mas mataas na sensitivity ng amplification, at mas mataas na specificity ng amplification.
■ 2× QuickEasyTM Ang Real PCR Mix -Ang Taqman ay gumagamit ng isang natatanging system na na-optimize ng Foregene para pahusayin ang sensitivity at specificity ng sequence-specific probe detection, na magagamit para sa genotyping at copy number variation determination at makakuha ng mga tumpak na resulta.
■ Ang produktong ito ay may kasamang ROX internal reference dye, na maaaring gamitin para alisin ang signal background at signal error sa pagitan ng mga balon, na maginhawa para sa mga customer na gamitin sa iba't ibang uri ng quantitative PCR instruments.
Application ng kit
■ Fluorescence quantitative PCR para sa template quantitative analysis;
■ Conventional PCR amplification;
■ Maaaring gamitin para sa allele detection.
Imbakan at buhay ng istante
Ang kit ay dapat na naka-imbak sa -20°C sa dilim;kung ito ay madalas na ginagamit, maaari din itong itago sa 4°C sa loob ng maikling panahon (maubos sa loob ng 10 araw).
Real Time PCR primer na mga prinsipyo sa disenyo
Forward Primer at Reverse Primer
Para sa Real Time PCR, napakahalaga ng disenyo ng panimulang aklat.Ang mga panimulang aklat ay nauugnay sa pagtitiyak at kahusayan ng PCR amplification, at maaaring idisenyo na may kaugnayan sa mga sumusunod na prinsipyo:
Haba ng panimulang aklat: 18-30bp.
Nilalaman ng GC: 40-60%.
Halaga ng Tm: Ang software ng disenyo ng panimulang aklat, gaya ng Primer 5, ay maaaring magbigay ng halaga ng Tm ng panimulang aklat.Ang mga halaga ng Tm ng upstream at downstream na mga primer ay dapat na mas malapit hangga't maaari.Ang formula ng pagkalkula ng Tm ay maaari ding gamitin: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Kapag nagsasagawa ng PCR, ang temperaturang mas mababa sa halaga ng primer na Tm na 5 °C ay karaniwang pinipili bilang temperatura ng pagsusubo (ang katumbas na pagtaas ng temperatura ng pagsusubo ay maaaring tumaas ang pagtitiyak ng reaksyon ng PCR).
Mga panimulang aklat at mga produkto ng PCR:
Ang disenyo ng primer na PCR amplification haba ng produkto ay mas mabuti na 100-150bp.
Ang mga panimulang aklat sa disenyo sa pangalawang lugar ng istruktura ng template ay dapat na iwasan hangga't maaari.
Iwasan ang pagbuo ng 2 o higit pang mga komplementaryong base sa pagitan ng 3′ dulo ng upstream at downstream primers.
Ang primer 3′ terminal base ay hindi maaaring naroroon na may 3 karagdagang magkakasunod na G o C.
Ang mga primer mismo ay hindi maaaring magkaroon ng mga pantulong na istruktura, kung hindi, isang istraktura ng hairpin ay mabubuo, na makakaapekto sa PCR amplification.
Ang ATCG ay dapat na ipamahagi nang pantay-pantay hangga't maaari sa primer sequence, at ang 3′ terminal base ay dapat na iwasan bilang T.
Appendix 1：Cell Direct RT-qPCR Kit component supplement pack
1.Solusyon sa Cell Lysis
|
| |||
| Mga bahagi ng kit (24-well lysis system / well) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 T | 500 T | ||
| Bahagiako | Buffer CL | 20 ml | 100 ML |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
| Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
| BahagiII | Pambura ng DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Mix
|
| |
| Mga bahagi ng kit (20 μl reaction system) | DRT-01011-B1 |
| 200 T | |
| 5× Direktang RT Mix | 800 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
|
| ||
| Mga bahagi ng kit (20 μl reaction system) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 T | 1000 T | |
| 2× Direktang qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
| 50× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1.7 ml | 10 ml |
